Translation of "Terminal tag" in German
																						The
																											specific
																											antiserum
																											with
																											antibodies
																											against
																											amino
																											acids
																											(Aa)
																											179-378
																											(with
																											N-terminal
																											His
																											tag)
																											of
																											H-SemaL
																											was
																											generated
																											by
																											immunizing
																											chickens
																											with
																											the
																											protein
																											purified
																											by
																											Ni
																											chelate
																											affinity,
																											chromatography
																											(as
																											described
																											in
																											Example
																											8).
																		
			
				
																						Das
																											spezifische
																											Antiserum
																											mit
																											Antikörpern
																											gegen
																											Aminosäuren
																											(Aa)
																											179-378
																											(mit
																											N-terminalem
																											His-Tag)
																											von
																											H-SemaL
																											wurde
																											durch
																											Immunisierung
																											von
																											Hühnern
																											mit
																											dem
																											durch
																											Ni-Chelat-Affinitãtschromatographie
																											gereinigten
																											Protein
																											erzeugt
																											(wie
																											in
																											Beispiel
																											8
																											beschrieben).
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						When
																											the
																											box
																											leaves
																											the
																											terminal
																											again,
																											the
																											tag
																											is
																											simply
																											removed
																											and
																											used
																											for
																											the
																											next
																											arriving
																											container.
																		
			
				
																						Verlässt
																											der
																											Container
																											das
																											Terminal
																											wieder,
																											wird
																											das
																											"Tag"
																											abgenommen
																											und
																											fÃ1?4r
																											die
																											nächste
																											ankommende
																											Box
																											verwendet.
															 
				
		 ParaCrawl v7.1
			
																						FIG.
																											21A
																											shows
																											the
																											Western
																											blot
																											analyses
																											of
																											the
																											Thraustochytrium
																											LPAAT
																											expressed
																											in
																											E.
																											coli
																											as
																											fusion
																											protein
																											(LPAAT-FP)
																											with
																											N-terminal
																											GST
																											tag
																											and
																											C-terminal
																											His
																											tag
																											(lines
																											E:
																											7
																											?g
																											soluble
																											protein
																											fraction,
																											line
																											M:
																											size
																											standard).
																		
			
				
																						Figur
																											21
																											A
																											zeigt
																											die
																											Westem-Blot-Analysen
																											der
																											in
																											E.
																											coli
																											als
																											Fusionsprotein
																											(LPAAT-FP)
																											mit
																											N-terminalem
																											GST-
																											und
																											C-terminalem
																											His-tag
																											exprimierten
																											Thraustochytrium-
																											LPAAT
																											(Spuren
																											E:
																											7
																											µg
																											lösliche
																											Proteinfraktion,
																											Spur
																											M:
																											Größenstandard).
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						The
																											substrate
																											ligands
																											are
																											usually
																											synthetic,
																											low
																											molecular
																											weight
																											peptide
																											substrates
																											which
																											have
																											two
																											artificial
																											residues
																											for
																											association
																											with
																											the
																											signaling
																											components,
																											for
																											example
																											an
																											amino
																											terminal
																											Flag
																											tag
																											and
																											a
																											carboxy
																											terminal
																											biotin
																											residue.
																		
			
				
																						Üblicherweise
																											handelt
																											es
																											sich
																											bei
																											den
																											Substratliganden
																											um
																											synthetische,
																											niedermolekulare
																											Peptidsubstrate,
																											die
																											für
																											die
																											Assoziation
																											mit
																											den
																											signalgebenden
																											Komponenten
																											zwei
																											artifizielle
																											Reste
																											aufweisen,
																											wie
																											beispielsweise
																											ein
																											aminoterminales
																											Flag-Tag
																											und
																											einen
																											carboxyterminalen
																											Biotin-Rest.
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						The
																											gene
																											(SEQ
																											ID
																											NO:
																											18)
																											of
																											the
																											aminotransferase
																											was
																											amplified
																											from
																											genomic
																											Pseudomonas
																											putida
																											DNA
																											and
																											subsequently
																											cloned
																											into
																											a
																											pASK-IBA5+
																											vector
																											with
																											N-terminal
																											Strep
																											tag
																											II
																											with
																											removal
																											of
																											the
																											start
																											ATG
																											of
																											the
																											aminotransferase
																											gene.
																		
			
				
																						Das
																											Gen
																											(SEQ
																											ID
																											NO:
																											18)
																											der
																											Aminotransferase
																											wurde
																											aus
																											genomischer
																											DNA
																											von
																											Pseudomonas
																											putida
																											amplifiziert
																											und
																											nachfolgend
																											in
																											einen
																											pASK-IBA5+
																											Vektor
																											mit
																											N-terminalem
																											Strep-tag
																											II
																											unter
																											Entfernung
																											des
																											Start-ATGs
																											des
																											Aminotransferasegens
																											kloniert.
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						The
																											gene
																											(SEQ
																											ID
																											NO:
																											26)
																											of
																											the
																											aminotransferase
																											was
																											amplified
																											from
																											genomic
																											Rhodobacter
																											sphaeroides
																											DNA
																											and
																											subsequently
																											cloned
																											into
																											a
																											pASK-IBA5+
																											vector
																											with
																											N-terminal
																											Strep
																											tag
																											II
																											with
																											removal
																											of
																											the
																											start
																											ATG
																											of
																											the
																											aminotransferase
																											gene.
																		
			
				
																						Das
																											Gen
																											(SEQ
																											ID
																											NO:
																											26)
																											der
																											Aminotransferase
																											wurde
																											aus
																											genomischer
																											DNA
																											von
																											Rhodobacter
																											sphaeroides
																											amplifiziert
																											und
																											nachfolgend
																											in
																											einen
																											pASK-IBA5+
																											Vektor
																											mit
																											N-terminalem
																											Strep-tag
																											II
																											unter
																											Entfernung
																											des
																											Start-ATGs
																											des
																											Aminotransferasegens
																											kloniert.
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						The
																											gene
																											(SEQ
																											ID
																											NO:
																											30)
																											of
																											the
																											aminotransferase
																											was
																											amplified
																											from
																											genomic
																											Mesorhizobium
																											loti
																											DSM2626
																											DNA
																											and
																											subsequently
																											inserted
																											into
																											a
																											pASK-IBA35+
																											vector
																											with
																											N-terminal
																											His
																											6
																											tag
																											with
																											removal
																											of
																											the
																											N-terminal
																											ATG
																											of
																											the
																											aminotransferase
																											gene.
																		
			
				
																						Das
																											Gen
																											(SEQ
																											ID
																											NO:
																											30)
																											der
																											Aminotransferase
																											wurde
																											aus
																											genomischer
																											DNA
																											von
																											Mesorhizobium
																											loti
																											DSM
																											2626
																											amplifiziert
																											und
																											nachfolgend
																											in
																											einen
																											pASK-IBA35+-Vektor
																											mit
																											N-terminalem
																											His
																											6
																											-tag
																											unter
																											Entfernung
																											des
																											N-terminalen
																											ATG
																											des
																											Aminotransferasegens
																											insertiert.
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						Sequencing
																											was
																											used
																											to
																											confirm
																											that
																											the
																											gene
																											of
																											the
																											enoate
																											reductase
																											was
																											successfully
																											ligated
																											in
																											the
																											plasmid
																											pET52b,
																											wherein
																											the
																											inserted
																											N-terminal
																											strep
																											tag
																											remained
																											available,
																											allowing
																											a
																											highly
																											specific
																											protein
																											purification.
																		
			
				
																						Über
																											eine
																											Sequenzierung
																											wurde
																											bestätigt,
																											dass
																											das
																											Gen
																											der
																											Enoatreduktase
																											erfolgreich
																											in
																											das
																											Plasmid
																											pET52b
																											ligiert
																											wurde,
																											wobei
																											der
																											eingefügte
																											N-terminale
																											Strep-tag
																											vorhanden
																											blieb,
																											der
																											eine
																											hochspezifische
																											Proteinaufreinigung
																											ermöglicht.
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						The
																											nucleotide
																											sequences
																											generated
																											by
																											means
																											of
																											PCR
																											mutagenesis
																											and/or
																											ordered
																											from
																											GeneArt
																											optionally
																											also
																											contained
																											a
																											C-
																											or
																											N-terminal
																											6×His
																											tag
																											on
																											an
																											amino
																											acid
																											level
																											and
																											were
																											integrated
																											by
																											means
																											of
																											standard
																											methods
																											into
																											expression
																											vectors
																											for
																											expression
																											in
																											E.
																											coli
																											or
																											P.
																											pastoris,
																											transformed
																											in
																											E.
																											coli
																											or
																											P.
																											pastoris
																											and
																											expressed
																											in
																											E.
																											coli
																											and
																											P.
																											pastoris
																											(J.
																											M.
																											Cregg,
																											Pichia
																											Protocols,
																											second
																											edition,
																											ISBN-10:
																											1588294293,
																											2007;
																		
			
				
																						Die
																											mittels
																											PCR-Mutagenese
																											generierten
																											bzw.
																											von
																											GeneArt
																											bezogenen
																											Nukleotidsequenzen
																											enthielten
																											auf
																											Aminosäureebene
																											optional
																											zusätzlich
																											einen
																											C-
																											oder
																											N-terminalen
																											6xHis-Tag
																											und
																											wurden
																											mittels
																											Standardmethoden
																											in
																											Expressionsvektoren
																											zur
																											Expression
																											in
																											E.
																											coli
																											oder
																											P.
																											pastoris
																											integriert,
																											in
																											E.
																											coli
																											oder
																											P.
																											pastoris
																											transformiert,
																											sowie
																											in
																											E.
																											coli
																											oder
																											P.
																											pastoris
																											exprimiert
																											(J.M.
																											Cregg,
																											Pichia
																											Protocols,
																											second
																											Edition,
																											ISBN-10:
																											1588294293,
																											2007;
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						The
																											specific
																											activity
																											of
																											the
																											polypeptides
																											and
																											variants
																											thereof
																											was
																											determined
																											photometrically,
																											wherein
																											all
																											the
																											polypeptides
																											used
																											had
																											a
																											C-terminal
																											6×His
																											tag.
																		
			
				
																						Die
																											Bestimmung
																											der
																											spezifischen
																											Aktivität
																											der
																											Polypeptide
																											sowie
																											von
																											Varianten
																											davon
																											erfolgte
																											photometrisch,
																											wobei
																											alle
																											eingesetzten
																											Polypeptide
																											einen
																											C-terminalen
																											6xHis
																											Tag
																											aufwiesen.
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						To
																											determine
																											the
																											optimum
																											pH
																											of
																											the
																											polypeptides
																											having
																											the
																											SEQ
																											ID
																											numbers
																											1,
																											2,
																											5,
																											6,
																											7,
																											9,
																											11,
																											12
																											and
																											15,
																											they
																											were
																											cloned
																											with
																											a
																											C-terminal
																											6×His
																											tag
																											as
																											described
																											in
																											Example
																											1,
																											expressed
																											in
																											E.
																											coli
																											and
																											purified.
																		
			
				
																						Zur
																											Bestimmung
																											des
																											pH-Optimums
																											der
																											Polypeptide
																											mit
																											den
																											SEQ
																											ID-Nrn.
																											1,
																											2,
																											5
																											und
																											6
																											wurden
																											diese
																											mit
																											einem
																											C-terminalen
																											6xHis-Tag
																											wie
																											in
																											Beispiel
																											1
																											beschriebenen
																											kloniert,
																											in
																											E.
																											coli
																											exprimiert
																											und
																											aufgereinigt.
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						The
																											gene
																											(SEQ
																											ID
																											NO:
																											32)
																											of
																											the
																											aminotransferase
																											was
																											amplified
																											from
																											genomic
																											Rhodobacter
																											sphaeroides
																											DSM158
																											DNA
																											and
																											subsequently
																											inserted
																											into
																											a
																											pASK-IBA35+
																											vector
																											with
																											N-terminal
																											His
																											6
																											tag
																											with
																											removal
																											of
																											the
																											N-terminal
																											ATG
																											of
																											the
																											aminotransferase
																											gene.
																		
			
				
																						Das
																											Gen
																											(SEQ
																											ID
																											NO:
																											32)
																											der
																											Aminotransferase
																											wurde
																											aus
																											genomischer
																											DNA
																											von
																											Rhodobacter
																											sphaeroides
																											DSM
																											158
																											amplifiziert
																											und
																											nachfolgend
																											in
																											einen
																											pASK-IBA35+-Vektor
																											mit
																											N-terminalem
																											His
																											6
																											-tag
																											unter
																											Entfernung
																											des
																											N-terminalen
																											ATG
																											des
																											Aminotransferasegens
																											insertiert.
															 
				
		 EuroPat v2
			
																						Examples
																											of
																											protein
																											tags
																											known
																											to
																											the
																											skilled
																											worker
																											are
																											an
																											N-
																											or
																											C-terminal
																											(HIS)
																											6
																											tag,
																											a
																											myc
																											tag,
																											a
																											FLAG
																											tag,
																											a
																											hemagglutinin
																											tag,
																											glutathione
																											transferase
																											(GST)
																											tag,
																											intein
																											with
																											chitin-binding
																											affinity
																											tag
																											or
																											maltose-binding
																											protein
																											(MBP)
																											tag.
																		
			
				
																						Beispiele
																											von
																											dem
																											Fachmann
																											bekannten
																											Protein-Tags,
																											sind
																											ein
																											N-
																											oder
																											C-terminales
																											(HIS)
																											6
																											-Tag,
																											ein
																											Myc-Tag,
																											ein
																											FLAG-Tag,
																											ein
																											Hämaglutenin-Tag,
																											Glutathion-Transferase
																											(GST)-Tag,
																											Intein
																											with
																											an
																											Affinity
																											Chitin-binding
																											Tag
																											oder
																											Maltose
																											binding
																											protein
																											(MBP)-Tag.
															 
				
		 EuroPat v2